◆CRISPR/Cas9介導基因敲除細胞系建立 服務編號：FW10
CRISPR/Cas9（Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats）是一種由RNA指導的Cas9核酸酶對靶向基因進行編輯的技術，其原理是通過crRNA（ CRISPR-derived RNA ）堿基配對與 tracrRNA （trans-activating RNA ）結合形成 tracrRNA/crRNA 復合物，并將Cas9 核酸酶帶到基因組上的具體靶點，并在Cas9 蛋白介導與crRNA 配對靶位點序列進行特異性識別，從而對特定基因位點進行切割導致突變。
一、服務內容
1. sgRNA設計和高效sgRNA篩選；
2. sgRNA表達載體構建；
3. sgRNA和Cas9質粒共轉染細胞和敲除細胞株篩選及鑒定。
二、收費標準
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服務項目
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內容說明
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收費標準￥
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實驗周期
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sgRNA設計和篩選
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針對特異性基因設計多條sgRNA序列
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5000
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1周
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高效sgRNA篩選載體構建
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選擇敲除效率最高的兩條sgRNA構建表達載體
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50000/基因
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4-6周
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基因敲除細胞系的建立
（提供1-2個敲除基因型細胞系和WT細胞系）
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使用sgRNA和Cas9共轉染細胞并對目的基因進行敲除
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250000/基因/細胞系
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3-5月
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三、實驗要求
1. 客戶提供培養狀態良好的目的細胞；
2. 客戶提供待敲除基因信息，包括基因名稱，NCBI號等；
三、終產品
1. 完整實驗報告
2. sgRNA篩選結果（含sgRNA序列和PCR鑒定結果等）
3. 基因敲除細胞系（細胞數目>1*106）（含基因敲除鑒定結果）
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