天德悅(北京)生物科技有限責任公司
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        010-80117836
        276385203@qq.com

         
        Western Blot
        RT-PCR
        IP&Co-IP
        ChIP
        載體構建和蛋白表達
        EMSA
        樣品處理
        小鼠多克隆抗體制備
        小鼠單克隆抗體制備
        (單)雙熒光素酶檢測
        細胞相關實驗服務1
        細胞相關實驗服務2
        CRISPR/Cas9介導基因敲除細胞系建立
        ips細胞誘導,鑒定和定向分化
        細胞寄送處理注意事項
        (單)雙分子熒光互補實驗

         
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        關于我們
        公司名稱:天德悅(北京)生物科技有限責任公司
        公司網址:www.joaniereynolds.com                                            Email: 276385203@qq.com            郵編:102299
        公司地址:北京市昌平區科技園區振興路36號院2號樓2層203            TEL:+8610-80117836                        

        ChIP檢測(Chromatin Immunoprecipitation, ChIP         服務編號:FW02

        第一部分:抗體IP驗證

        免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)

        服務內容

        1. 溫和條件下進行蛋白抽提,BCA定量,調整蛋白濃度

        2. 樣品預處理:用Protein A/G Sepharose孵育

        3. 樣品與IP抗體進行孵育

        4. 洗滌Protein A/G Sepharose-Antibody-Protein Complex,并對免疫復合物進行變性處理

        5. 沉淀產物SDS-PAGE或者WB鑒定(目前暫不提供別的鑒定)

        6. Western blot檢測

        1 電泳:聚丙烯酰胺凝膠(SDS-PAGE)分離蛋白樣品

        2 濕法轉。BLOTINGTank Transfer

        3 雜交:用抗體鑒定膜上的特定蛋白(INCUBATION: Antibody

        4 化學發光檢測(ECL),膠片曝光,TotalLab Quant軟件讀取IOD值(可選)

        樣品要求(樣品處理及保存見附件)

        1. 細胞>1×107;組織>30mg;細菌濕重50mg;植物>100mg;血清>50ul

        2. 樣品蛋白濃度>1mg/ml,蛋白量>500ug/樣品

        收費標準

        服務項目

        收費標準¥

        實驗周期

        免疫沉淀

        7500/基因

        3-4

        免疫沉淀+可曝光marker

        7800/基因

        3-4

        ImageQuant TL讀取條帶IOD值及計算

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        客戶提供材料

        1、 新鮮或正確保存的樣品

        2、 目的蛋白一抗

        3、 陽性對照樣品(盡量提供)

        4、 相關文獻(可選)

        提交給客戶結果

        1、預實驗曝光結果(膠片及掃描圖),預實驗采取2個一抗稀釋度

        2、正式實驗曝光結果(膠片及掃描圖)

        3、完整實驗報告

        4、IOD值分析報告(可選)

        5、抗體是否可以適用于IP是進行ChIP的前提

        服務說明

        1. 待檢測樣品可以是待檢測蛋白樣品,也可以是細胞、組織等其他樣品;

        2. 免疫沉淀用抗體;

        3. 檢測用抗體;

        4. 特異性二抗由天德悅(北京)生物科技有限責任公司提供;

        5. IP檢測可以不進行,但是不能保證后續實驗的結果。

        對照設置

        1、 空白:無抗體,只有protein A/G

        2、 陰性對照:無蛋白,有抗體及protein A/G

        3、 陰性對照:未轉染細胞或者基因敲除樣品

        4、 無關空白抗體

        5、蛋白裂解液上清:Input

         

          

        第二部分

        染色質免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP

        服務內容

        1. 樣品甲醛交聯固定、終止、收集樣品、裂解樣品

        2. 超聲或者酶解處理樣品DNA成片段,瓊脂糖電泳檢測

        3. 樣品預處理:用Protein A/G Sepharose孵育

        4. 樣品與IP抗體進行孵育

        5. 洗滌Protein A/G Sepharose-Antibody-Protein Complex,并對免疫復合物進行變性處理,提取DNA樣品

        6. 檢測

        1 實時熒光定量PCR檢測(最常用,免費檢測)

        2 DNA芯片檢測(需要聯系測試廠家,需要另付費。詢價)

        3 DNA產物測序(需要聯系測試廠家,需要另付費。詢價)

        收費標準

        服務項目

        收費標準¥

        實驗周期

        ChIP

        25000/基因

        3-4

        實時熒光定量RT-PCR

        免費

        2

         

        客戶提供材料

        1、新鮮或正確保存的樣品

        2、目的蛋白一抗,空白或者陰性同種屬IgG

        3、陽性對照樣品(盡量提供)

        4、ChIP檢測試劑盒

         

         

         
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