天德悅(北京)生物科技有限責任公司
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        010-80117836
        276385203@qq.com

         
        Western Blot
        RT-PCR
        IP&Co-IP
        ChIP
        載體構建和蛋白表達
        EMSA
        樣品處理
        小鼠多克隆抗體制備
        小鼠單克隆抗體制備
        (單)雙熒光素酶檢測
        細胞相關實驗服務1
        細胞相關實驗服務2
        CRISPR/Cas9介導基因敲除細胞系建立
        ips細胞誘導,鑒定和定向分化
        細胞寄送處理注意事項
        (單)雙分子熒光互補實驗

         
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        關于我們
        公司名稱:天德悅(北京)生物科技有限責任公司
        公司網址:www.joaniereynolds.com                                            Email: 276385203@qq.com            郵編:102299
        公司地址:北京市昌平區科技園區振興路36號院2號樓2層203            TEL:+8610-80117836                        

        ◆細胞轉染,穩定細胞系建立及細胞模型

        一、服務內容

        1、細胞轉染和穩定表達細胞株篩選

        通過轉染試劑或電穿孔方式等方式,將目的基因導入貼壁細胞或懸浮細胞24-48小時后,目的基因即在細胞內表達。此時為了建立穩定細胞系,可根據不同基因載體中所含的抗性標記,選用相應的藥物對靶細胞進行篩選,從而得到穩定表達外源基因的細胞克隆。觀察目的基因及其表達蛋白在某種細胞中的功能(短時間即可進行觀察,但效應會很快丟失)。

        2、針對不同種類細胞使用藥物,低氧,壓力等外源因素進行刺激等處理,建立相關的細胞模型,從而進行后續的研究工作。

        二、樣品要求(樣品處理及保存見附件)

        1干冰運輸:取對數生長期的細胞,消化后低速離心1000rpm,5min收集細胞,加入適量配制好的凍存液后吹打均勻。將細胞分裝入凍存管中,標明細胞的名稱、細胞代次、凍存時間及操作者;放4℃冰箱30min,-2030min1h,-80℃過液,然后放入液氮罐;細胞數目不少于5×106/ml;

        2常溫運輸:細胞貼壁覆蓋瓶底面積達40%以上時,裝滿培養液,瓶口用封口膜封好,裝入盒子,盒子里用泡沫或棉花塞滿,讓瓶子固定在盒子中。

        三、服務特點

        1、針對不同細胞系篩選合適的轉染試劑和質粒濃度配比,提高轉染效率和蛋白表達量

        2、豐富的抗生素篩選經驗和單細胞克隆鑒定方法提高實驗效率

        3、構建的穩定表達細胞株可穩定傳代,極少發生性狀丟失

        四、收費標準

        服務項目

        收費標準¥

        實驗周期

        蛋白瞬時表達或敲低

        基因表達或敲低載體構建

        請參見載體構建目錄

        2-3

        質粒大提(含去內毒素)

        700/質粒

        1

        載體轉染

        3000/樣品

        1

        Western Blot檢測蛋白表達或敲低

        2000/目的蛋白/

        2

        蛋白穩定表達細胞株構建(混合克。

        表達載體構建

        請參見載體構建目錄

        2-3

        質粒大提(含去內毒素)

        700/質粒

        1

        轉染和抗生素篩選

        40000/細胞系

        3-4

        Western Blot檢測穩定細胞株蛋白表達

        2000/目的蛋白/

        2

        蛋白穩定表達細胞株構建(單克。

        表達載體構建

        請參見載體構建目錄

        2-3

        質粒大提(含去內毒素)

        700/質粒

        1

        轉染和抗生素篩選

        50000/細胞系

        6-8

        Western Blot檢測穩定細胞株蛋白表達

        2000/目的蛋白/

        2

        蛋白敲低細胞系構建(單克。

        shRNA表達載體的構建

        請參見載體構建目錄

        2-3

        質粒大提(含去內毒素)

        700/質粒

        1

        轉染和抗生素篩選

        60000/細胞系

        6-8

        Western Blot檢測敲低細胞株蛋白表達

        2000/目的蛋白/

        2

        蛋白真核表達(分泌表達)

        分泌型表達載體的構建

        請參見載體構建目錄

        2-3

        質粒大提(含去內毒素)

        700/質粒

        1

        細胞轉染

        3000/質粒

        2

        蛋白表達檢測(Western Blot ELISA

        2000/目的蛋白/膜;600/

        2

        蛋白表達和純化

        20000/mg

        2

        五、客戶提供材料

        1、待克隆基因和載體信息,待敲低基因信息和shRNA序列信息(如無相關shRNA序列信息,本公司可代為設計并收取相關費用);

        2、待轉染細胞株(如需使用常用腫瘤細胞株,如293/293T、HeLa等可由本公司提供);

        3、陽性對照樣品(盡量提供)

        4、相關文獻(可選)

        六、提交給客戶結果

        1、構建完成的載體和甘油菌株;

        2、完整測序報告和序列堿基圖

        3、載體真核表達鑒定結果

        4、載體真核表達蛋白

        5、穩定表達細胞株>1×107

        6、穩定敲低細胞株>1×107

        7、完整實驗報告(包括基因擴增圖,細胞株過表達和敲低檢測結果圖等)

         

         

        ◆細胞功能學檢測

        一、服務內容

        1、Transwell檢測

        2、細胞劃痕檢測

        3、細胞增殖/抑制曲線

        4、細胞生長曲線

        5、細胞凋亡檢測

        6、細胞活力檢測

        7、細胞凋亡/自噬模型

        8、細胞增殖模型

        9、訂制細胞模型

         

        二、樣品要求(樣品處理及保存見附件)

        1、待檢測細胞系及培養條件等信息(本公司可免費提供常見人和小鼠細胞系,如HeLa、293T、3T3等)

        2、實驗相關藥物必須達到分析純(特殊藥物也可以使用化學純),且來源可靠。

        三、服務特點

        1、可根據不同實驗目的幫助客戶選擇最優實驗方法

        2、根據不同細胞系建立相關的研究模型

        四、收費標準

        服務項目

        收費標準¥

        實驗周期

        細胞活力檢測

        細胞培養

        1500/細胞

        待定

        MTT

        300/樣品(三個重復)

        1-2

        MTS

        2000/細胞/處理(三個重復)

        1-2

        CCK8

        2000/細胞/處理(三個重復)

        1-2

        加入藥物或其它處理后檢測

        請詢價

        2

        細胞凋亡檢測

        Tunel法(Roche試劑盒)

        500/樣品(5500/試劑盒)

        (含熒光顯微鏡拍照)

        2-3

        流式細胞術

        600/樣品(含上機費)

        2-3

        瓊脂糖凝膠電泳檢測法

        300/樣品

        2

        細胞曲線

        細胞生長曲線

        2000/細胞

        1-2

        細胞增殖/抑制曲線

        3000/細胞/處理

        1-2

        細胞侵襲(Transwell法)和遷移檢測

        Transwell系統(0.4, 1.0, 3.0, 8.0 μm孔徑)

        8000/

        2-3

        Transwell系統(0.4, 1.0, 3.0, 8.0 μm孔徑)

        8000/

        2-3

        細胞劃痕檢測

        2000/細胞/處理

        2-3

        細胞模型建立

        細胞凋亡/自噬模型

        8000/株細胞

        4-6

        細胞增殖模型

        6000/株細胞

        4-6

        其它訂制細胞模型

        請詢價

        4-6

        五、客戶提供材料

        1、待檢測或處理的細胞株

        2、細胞處理相關藥物或特殊試劑

        3、相關文獻(可選)

        六、提交給客戶結果

        1、相應的數據結果、圖片和分析結果

        2、建立相應模型的細胞株

        3、完整實驗報告

         

         

        ◆原代細胞分離培養

        一、服務內容

        1、原代細胞分離培養

        2、原代干細胞培養

        二、樣品要求(樣品處理及保存見附件)

        1、干冰運輸:新鮮的組織或細胞塊離體后-80℃保存,并用干冰盡快送至本公司實驗室;

        2、實驗動物運輸:實驗動物(如小鼠、大鼠或兔)用合適的運輸籠裝好后快遞或送至本公司實驗室;

        三、服務特點

        1、擁有多種原代細胞分離培養經驗

        2、分離培養的細胞具有很高的成活率

        四、收費標準

        服務項目

        收費標準¥

        實驗周期

        小鼠原代細胞系建立

        40000/細胞系

        3-4

        大鼠原代細胞系建立

        40000/細胞系

        3-4

        原代細胞系建立

        40000/細胞系

        3-4

        人原代細胞系建立

        60000/細胞系

        3-4

        特殊原代細胞系建立

        請詢價

        4-6

        原代細胞系鑒定(WB,IF等)

        參考相關實驗目錄

        參考相關實驗目錄

        原代干細胞培養

        請詢價

        根據細胞種類待定

        五、客戶提供材料

        1、如實驗動物沒有特殊要求,如轉基因小鼠等。本公司可負責直接從所需實驗動物分離培養出所需原代細胞。

        2、關于細胞培養條件的說明:本公司提供DMEM培養基,RPIM1640培養基以及G418抗生素,如需其它培養基及篩選條件,也請客戶一并提供。特殊基因請客戶提供相應抗體以供檢測

         

        六、提交給客戶結果

        1、分離培養的穩定原代細胞株>1×107;

        2.相關鑒定實驗報告;

        3、實驗報告;

         

         

         
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